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蛋白質(zhì)純化 -八聯(lián)管離心機(jī)的新技術(shù)
是當(dāng)代生物產(chǎn)業(yè)當(dāng)中的核心技術(shù)。該技術(shù)難度、成本均高;例如一個(gè)生物藥品的成本75%都花在下游蛋白質(zhì)分離純化當(dāng)中。常用技術(shù)有:
1、沉淀,
2、電泳:蛋白質(zhì)在高于或低于其等電點(diǎn)的溶液中是帶電的,在電場(chǎng)中能向電場(chǎng)的正極或負(fù)極移動(dòng)。根據(jù)支撐物不同,有薄膜電泳、凝膠電泳等。
?。?、透析:利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開(kāi)的方法。
?。?、層析:
a.離子交換層析,利用蛋白質(zhì)的兩性游離性質(zhì),在某一特定PH時(shí),各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同,故可以通過(guò)離子交換層析得以分離。如陰離子交換層析,含負(fù)電量小的蛋白質(zhì)首先被洗脫下來(lái)。
b.分子篩,又稱(chēng)凝膠過(guò)濾。小分子蛋白質(zhì)進(jìn)入孔內(nèi),滯留時(shí)間長(zhǎng),大分子蛋白質(zhì)不能時(shí)入孔內(nèi)而徑直流出。
?。?、超速離心:既可以用來(lái)分離純化蛋白質(zhì)也可以用作測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量。不同蛋白質(zhì)其密度與形態(tài)各不相同而分開(kāi)。